一個(gè)内行人需要瞭(le)解的細胞爬片知識

　　細胞爬片又名爬片，就是讓玻片浸在細胞培養基内，細胞在玻片上生長
，主要用於組織學，免疫組織hua學，冰凍切片，細胞塗片，原位雜交等,細胞爬片是根據實驗研究的需要,使貼壁細胞在一定的固相表面(如蓋玻片、載玻片)上貼壁生長而獲得的一種體外細胞實驗材料。
 

　　我們在做免疫熒光（IF），激光共聚焦(Confocal)，凋亡檢測（TUNEL）時，免不瞭(le)要制備(bèi)細胞爬片，爬片質量*決定瞭(le)後拍照的質量以及實驗數據的性。

　　在醫學生物研究中，免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。現有的細胞爬片多採(cǎi)用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫熒光檢測時，爲瞭(le)節約抗體，需免疫組化筆在爬片上進行範圍的圈定，将抗體加入劃定區域，免疫組化筆中的疏水成分阻滞抗體溢出所圈定的範圍，從而達到節約抗體的目的。

　　但在實際使用過程中，會有大量免疫組化筆(bǐ)的成分混入目标範圍内，且線條粗大，造成樣品數量減少，同時混入目标範圍内的免疫組化筆(bǐ)的成分容易造成背景噪聲及雜質影響免疫熒光的結果，嚴重影響實驗結果的準確(què)。

　　爬片的準備:

　　1、爬片可用一般的蓋(gài)玻片，也可用爬片；

　　2、應用蓋玻片，可根據自己的需要剪裁成合适的大小，以備(bèi)置於(yú)6孔闆、12孔闆或24孔闆；

　　3、将剪裁好的爬片，置於濃硫酸中浸泡並(bìng)過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再用三蒸水沖洗3遍（個人認爲主要目的是沖洗幹淨就可以瞭(le)），放在飯盒或者培養皿（一定是玻璃的哦，要不然就……）中烘幹後進行高壓消毒。

　　培養闆的準備:

　　1、泡酸過夜

　　2、沖(chōng)洗，烘幹(gàn)（1、2步驟與前大緻相同）

　　3、放入超淨工作台用紫外線照1～2小時就可以用瞭(le)（在照之前可以将爬片一並(bìng)放入，若細胞貼壁能力不強，可經多聚賴氨酸浸片後放入。貼壁能力強的話，就可以省略瞭(le)，進行紫外線消毒）

　　注
：此步自己的經驗是爬片可以先浸入消毒後的PBS内，緊接著(zhe)放入培養闆内。目的：浸過PBS的爬片依靠表面的液體，可以用培養闆孔底貼和緊密，以利於(yú)細胞長到爬片上。