細胞培養專題(tí)——6孔闆接種和換(huàn)液

　　（1）問：我的細胞傳代很正常，但一種到六孔闆裏（不管加藥和對照），總有兩三個孔（随機）細胞長(zhǎng)得不好，很小，像破碎瞭(le)。有人遇到過這種情況嗎？到底是啥原因呢？請各位指點

　　答：可能跟你加液的溫度有關。如果你細胞剛剛拿出來換液加液，培養基也是從4度冰箱拿出來不久，很容易細胞就會凍死瞭(le)。建議你最好把培養基先在培養箱裏邊(biān)孵育15min先。

　　另外，跟你細胞的生長(zhǎng)狀态也有關。加藥之前的細胞可以用高點(diǎn)的血清濃度培養。保證細胞狀态良好。

　　或者放在37度水浴鍋裏孵育也可以，或者是培養闆本身的問題，你再換換其他培養闆試試看。再有可能就是細胞狀态問題瞭(le)，種闆時的血清濃度調(diào)高試一下

　　（2）問：最近幾天，我用六孔培養闆接種細胞
，培養24小時後更換培養基，在更換培養基之前，顯微鏡觀察到細胞貼壁，狀态非常的好，更換瞭(le)培養基後，立即用顯微鏡觀察
，發現每個孔中都近乎有一半的細胞表現出近乎死亡的狀态。細胞變(biàn)得非常小，産生大量的碎片，而另一半的細胞一切正常，異常細胞與正常細胞之間存在一條分水嶺，上半個圓是好的，下半個圓就不好，這是怎麽一回事？

　　答：你可以看一下是不是培養闆沒放水平。有一回我也出現過這種情況。你的培養液如何，如果培養液過期，細胞就不會貼壁。換一點新配制的培養液試一試。我也經常碰到，我想可能是闆的問題，換一個牌子的闆或換用培養瓶就沒問題瞭。不知樓主所需換液的培養闆多不多，換培養基的時候如果沒有注意風機的影響，特别是所需換液的培養闆很多時，容易使細胞因風吹失水而幹縮破裂。如果如此，換液時應該逐個培養闆進行，别怕浪費吸管，注意操作的效率！